Получение солеустойчивых трансгенных растений пшеницы (Triticum aestivum L) с помощью бомбардировки частицами

Вербицкая Анастасия Алексеевна, Гапоненко Александр Константинович

Разработан эффективный метод регенерации трансгенных растений пшеницы для получения солеустойчивых трансгенных растений пшеницы с помощью бомбардировки частицами. Исследование роли различных генов ТФ участвующих в ответе растений на абиотические стрессы (дефициту воды и засолению почв), относится к числу приоритетных в современной науке. Во время этой работы был совершен переход от модельного объекта к важнейшей сельскохозяйственной культуре – пшенице. Растения, полученные этим методом, фенотипически нормальны и полностью фертильны. Методика применена на сортах яровой мягкой пшеницы - Злата, Эстер, Агата, Амир. Эффективность биобаллистической трансформации каллусов данных сортов, эффективность которой составила - 1.4%-7.8 % в зависимости от используемого генотипа. Самая высокая частота трансформации наблюдалась у эксплантов сорта Злата. Этот метод обеспечивает эффективную регенерацию трансгенных побегов, если в качестве мишени для трансформации используются незрелые зародыши с морфогенным каллусом, полученным от растений-доноров после холодового шока. Вектор несущий ген транскрипционного фактора OsGATA, может быть использован для получения трансгенных линий озимых сортов пшеницы и других злаковых культур. Морфогенный каллус получают на среде, содержащей пиклорам. Частота каллусообразования составила 51,2 - 97,2 %, частота побегообразования 62,76 - 83,98%. Для введения чужеродной ДНК используется биобаллистический метод - прямое введение генов с помощью пушки PIG (particle inflow gun).

Ключевые слова:пшеница, биобаллистическая трансформация, солеустойчивость, генная инженерия, фактор транскрипции, gata.